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小饅頭來學(xué)習(xí)新蟲 (初入文壇)
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[求助]
緊急求助：用凝血酶切GST時(shí)，但目標(biāo)蛋白短時(shí)間內(nèi)被降解，怎么回事？ 已有1人參與
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| 本人利用gst標(biāo)簽純化處一種蛋白，但過完親和柱后在用凝血酶切標(biāo)簽時(shí)，短時(shí)間（1.5h）內(nèi)目標(biāo)蛋白（42KD左右）被降解，這期間gst標(biāo)簽也會(huì)被正常切下。跑變性電泳，只會(huì)得到標(biāo)簽（27KD）條帶和標(biāo)簽下的一條帶，但用凝膠色譜柱分離時(shí)，第一個(gè)峰對(duì)應(yīng)的是下面的條帶，第二個(gè)峰對(duì)應(yīng)的才是GST標(biāo)簽，酶切條件是25攝氏度，80rmp。望各位大神給予幫助分析分析原因，初來報(bào)到，金幣有限，在此獻(xiàn)出全部家當(dāng)尋求幫助，拜托拜托....... |
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fuyuandj86
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2樓2015-03-19 02:18:12
小饅頭來學(xué)習(xí)
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3樓2015-03-19 10:03:33
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4樓2015-03-19 10:05:35
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