 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1238 | 回復(fù): 6 | ||
夏天的普洱茶木蟲 (著名寫手)
|
[求助]
難道這個問題真的沒有人遇到過嗎？ 已有1人參與
|
最近在做畢赤酵母表達(dá)，pGAPZ ALHPA A這個載體，菌株是SMD1168H。篩選以后提了酵母基因組，PCR也擴(kuò)到了條帶，但是問題出現(xiàn)了，這些菌落在平板上是有酶活的，試了三種底物，都證明在平板上有酶活。但是液體發(fā)酵，試了YPDS,YEPG,YNB BMGW培養(yǎng)基，碳源用了Lactose,glucose,sorbitol,從第一天開始搖瓶，測了21天沒測到酶活，不存在沒有分泌的可能，因?yàn)榘獍麅?nèi)全測了。折騰了快半年了，老板說他從來沒遇到過這種情況，我就想知道，難道真的沒有人遇到過么？ 對了，還濃縮了上清，做了SDS-PAGA 和HIS-TAG INVISION STAIN，全都彌散，沒有條帶。如果真沒壓根就沒產(chǎn)蛋白，那平板上三種不同底物的酶活是哪里來的？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有63人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- CMES從2014年8月開始就沒有文章被SCI檢索了，請問有人知道是怎么回事嗎？
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 關(guān)于latex中公式引用問題。
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 最好的流行，莫過于推行一種文化---一些關(guān)于環(huán)境問題的思考
已經(jīng)有41人回復(fù)
- 請問在plos one注冊的這個賬號怎么注銷？有沒有人注銷過？謝謝！
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 請問，邀請函里寫的是“a fee of...”不寫“bench fee”會影響報銷嗎？謝謝~
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 大家遇到過這個問題嗎:關(guān)于文獻(xiàn)引用授權(quán)書！！
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 有沒有人遇到過柱壓降低，柱效反而不好的情況？
已經(jīng)有8人回復(fù)
- fluent14編譯UDF時總是出錯，求高手�。。�！難道沒人遇到過嗎？？？
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 投BT雜志返回意見問詢
已經(jīng)有10人回復(fù)
- bradford蛋白定量試劑盒測蛋白問題
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 難道就沒有人讀武漢理工的博士么？武漢理工那么差？？
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 求助 origin作圖不能輸出圖片——已解決
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 求助：關(guān)于二聚體的結(jié)合能和nosymm關(guān)鍵字的問題
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 難道就沒有人投過AI communications嗎？救人啊～～
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助】XCrySDen 在WINDOWS7下的安裝的問題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 有沒有人投稿填過“Authorship Confirmation”（作者確認(rèn)書）��？
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 【求助】柱層析用的硅膠如何活化？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】大腸桿菌搖菌時長時不長
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 關(guān)與ACS在JUST ACCEPTED 下看到的作者順序問題
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助】關(guān)于環(huán)境溫度對球磨效果的影響如何消除
已經(jīng)有12人回復(fù)
chrome1986
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 9 (幼兒園)
- 金幣: 4143.9
- 散金: 436
- 紅花: 1
- 帖子: 686
- 在線: 302.4小時
- 蟲號: 1024935
- 注冊: 2010-05-21
- 專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)
2樓2015-04-10 08:30:00
lomis
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 43 (小學(xué)生)
- 金幣: 1766.8
- 散金: 420
- 紅花: 25
- 帖子: 896
- 在線: 369.2小時
- 蟲號: 1884761
- 注冊: 2012-07-09
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物材料
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
kx444555: 金幣+3, 鼓勵交流 2015-04-10 09:21:59
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
kx444555: 金幣+3, 鼓勵交流 2015-04-10 09:21:59
|
1. 你確定平板上沒有干擾因素干擾顯色？ 2. 在平板上即使有酶活，不說明是分泌的，因?yàn)槿绻愕牡孜锸切》肿�，在胞�?nèi)表達(dá)的也可以顯色，平板顯色本身來說是一個很靈敏的篩選方法，一點(diǎn)點(diǎn)的酶就可以（大部分單個菌落的表達(dá)量足以顯色），即使是瞬時表達(dá)的，也可以顯色。而你在發(fā)酵液中表達(dá)后可能測試的時候已降解。 3. 如果是我，因?yàn)闀r間是有限的，我會更換載體或宿主，如果還是一樣情況，則不用酵母表達(dá)，更換其他宿主。 |
3樓2015-04-10 08:50:35
夏天的普洱茶
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 69 (初中生)
- 金幣: 5116.5
- 紅花: 18
- 帖子: 1048
- 在線: 441.4小時
- 蟲號: 1427657
- 注冊: 2011-10-05
- 性別: MM
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
4樓2015-04-10 09:27:25
夏天的普洱茶
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 69 (初中生)
- 金幣: 5116.5
- 紅花: 18
- 帖子: 1048
- 在線: 441.4小時
- 蟲號: 1427657
- 注冊: 2011-10-05
- 性別: MM
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
5樓2015-04-10 09:31:56
夏天的普洱茶
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 69 (初中生)
- 金幣: 5116.5
- 紅花: 18
- 帖子: 1048
- 在線: 441.4小時
- 蟲號: 1427657
- 注冊: 2011-10-05
- 性別: MM
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
6樓2015-04-11 05:13:05
houmaoqi
版主 (職業(yè)作家)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 貴賓: 0.255
- 金幣: 20083.7
- 散金: 1095
- 紅花: 25
- 沙發(fā): 14
- 帖子: 3154
- 在線: 1094小時
- 蟲號: 467850
- 注冊: 2007-11-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 高分子合成化學(xué)
- 管轄: 醫(yī)藥類考試
7樓2017-12-18 23:44:25
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 夏天的普洱茶 的主題更新
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 2026年華南師范大學(xué)歡迎化學(xué)，化工，生物，生醫(yī)工等專業(yè)優(yōu)秀學(xué)子加入！ +3 | llss0711 2026-03-28 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 調(diào)劑310 +8 | 溫柔的晚安 2026-03-25 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑求院校招收 +6 | 鶴鯨鴿 2026-03-28 | 6/300 |
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +6 | 曼殊2266 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +6 | 十閑wx 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +3 | 希望上岸阿小楊 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 張芳銘-中國農(nóng)業(yè)大學(xué)-環(huán)境工程專碩-298 +4 | 手機(jī)用戶 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿211院校 344分 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生物學(xué)學(xué)碩，求調(diào)劑 +5 | 丶風(fēng)雪夜歸人丶 2026-03-26 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 279 分 求調(diào)劑 +4 | 睡個好覺_16 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 315調(diào)劑 +4 | 0860求調(diào)劑 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿鄭大085600，310分求調(diào)劑 +5 | 李瀟可 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 325求調(diào)劑 +3 | Aoyijiang 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑 +3 | 丹青奶蓋 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 中國科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院-光纖傳感課題組招生-中國科學(xué)院大學(xué)、深圳理工大學(xué)聯(lián)培 +5 | YangTyu1 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 網(wǎng)絡(luò)空間安全0839招調(diào)劑 +4 | w320357296 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 347求調(diào)劑 +4 | L when 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿吉林大學(xué)材料與化工303分求調(diào)劑 +4 | 為學(xué)666 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考博] 26申博自薦 +3 | whh869393 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿重慶大學(xué)085700資源與環(huán)境，總分308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-23 | 8/400 |
|