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工大新年新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
求指導(dǎo) 三個(gè)月沒(méi)有出來(lái) 求各位大神指導(dǎo)
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1.細(xì)胞裂解我用的RIPA裂解液強(qiáng)裂解的細(xì)胞半小時(shí)，加入了蛋白酶抑制劑 99比1 12%跑膠發(fā)現(xiàn)小分子蛋白條帶很弱。目的蛋白HO-1 28KD 2 WB轉(zhuǎn)膜MARKER可以看到轉(zhuǎn)的很漂亮 NC膜 11V 14分鐘，封閉 2，6,8,9小時(shí)都試過(guò)，一抗4度過(guò)夜，洗膜3次每次10分鐘。2抗兩小時(shí)，洗膜三次每次10分鐘，有時(shí)一兩小時(shí)，一抗1比500 1000都試過(guò)，二抗1比1000 2000也試過(guò) 發(fā)現(xiàn)壓片內(nèi)參 目的蛋白從來(lái)沒(méi)有出來(lái)過(guò) 求大神指導(dǎo) 用麗春紅染色轉(zhuǎn)膜轉(zhuǎn)上去了 |
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2樓2017-06-18 19:16:07
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