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天羽耀星夢新蟲 (小有名氣)
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枯草芽孢桿菌生長曲線的測定？細(xì)節(jié)問題
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枯草芽孢桿菌生長曲線的測定，菌量測定用什么方法比較好？有的人是在顯微鏡上用血求計(jì)數(shù)板數(shù)，有的用稀釋涂板，有的用分光光度計(jì)測OD值，有的直接繪制OD值曲線，有的換算成菌量繪制。哪個準(zhǔn)確些？ 如果用紫外分光光度計(jì)測的話，在哪那個波長測OD值，如何確定？OD值與菌量關(guān)系如何測定？后面菌量大的時候如何稀釋？用什么稀釋？稀釋多少倍合適？ 實(shí)驗(yàn)過程中，取樣的時間用不用刨除？用不用在紫外下滅菌再取樣？取樣一般去多少合適？前面取樣后，發(fā)酵液逐漸減少，對后面的發(fā)酵有沒有影響？用不用做重復(fù)？重復(fù)的話是都測還是在某一時間只測其中一個？ 作為種子液的話，接種是在什么時候比較好？對數(shù)期中間還是... |
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zht930528
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
天羽耀星夢: 金幣+1 2015-04-21 00:24:53
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我覺得不論用哪種方法都是測定一個菌量的范圍，比如說10八次方。至于哪種方法比較好我也不敢太確定。 我一直在用分光光度法來確定菌體的生長曲線，不需要紫外，用可見光OD600波長就行。一般菌體生長到對數(shù)中后期便可以達(dá)到10八次方數(shù)量級�？梢悦扛�2小時取樣測定吸光度，連續(xù)取樣12到24小時，有的菌體生長很緩慢，需要測定的時間會長一些，甚至?xí)_(dá)到24小時以上。。。 至于取樣的時間，個人覺得不需要刨除，每次取樣速度要快，最好在超凈臺中操作，取完后可以先將菌液放入搖床再去測量。 每次取樣后發(fā)酵液肯定會減少，甚至到最后發(fā)酵液都被用掉，理論上講肯定會對結(jié)果有影響，但是個人覺得影響不會很大，應(yīng)該不會影響到生長曲線的繪制，畢竟只是大致確定一個生長時期，不需要確定具體的菌量。 種子液接種時期要看你試驗(yàn)?zāi)康�，我一般是在對�?shù)生長末期進(jìn)行接種。只要在對數(shù)期應(yīng)該就好。 |
4樓2015-04-20 10:25:09
courageeee
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