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天羽耀星夢(mèng)新蟲 (小有名氣)
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[交流]
枯草芽孢桿菌生長曲線的測(cè)定？細(xì)節(jié)問題
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枯草芽孢桿菌生長曲線的測(cè)定，菌量測(cè)定用什么方法比較好？有的人是在顯微鏡上用血求計(jì)數(shù)板數(shù)，有的用稀釋涂板，有的用分光光度計(jì)測(cè)OD值，有的直接繪制OD值曲線，有的換算成菌量繪制。哪個(gè)準(zhǔn)確些？ 如果用紫外分光光度計(jì)測(cè)的話，在哪那個(gè)波長測(cè)OD值，如何確定？OD值與菌量關(guān)系如何測(cè)定？后面菌量大的時(shí)候如何稀釋？用什么稀釋？稀釋多少倍合適？ 實(shí)驗(yàn)過程中，取樣的時(shí)間用不用刨除？用不用在紫外下滅菌再取樣？取樣一般去多少合適？前面取樣后，發(fā)酵液逐漸減少，對(duì)后面的發(fā)酵有沒有影響？用不用做重復(fù)？重復(fù)的話是都測(cè)還是在某一時(shí)間只測(cè)其中一個(gè)？ 作為種子液的話，接種是在什么時(shí)候比較好？對(duì)數(shù)期中間還是... |
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
天羽耀星夢(mèng): 金幣+1 2015-04-21 00:24:53
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
天羽耀星夢(mèng): 金幣+1 2015-04-21 00:24:53
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我覺得不論用哪種方法都是測(cè)定一個(gè)菌量的范圍，比如說10八次方。至于哪種方法比較好我也不敢太確定。 我一直在用分光光度法來確定菌體的生長曲線，不需要紫外，用可見光OD600波長就行。一般菌體生長到對(duì)數(shù)中后期便可以達(dá)到10八次方數(shù)量級(jí)�？梢悦扛�2小時(shí)取樣測(cè)定吸光度，連續(xù)取樣12到24小時(shí)，有的菌體生長很緩慢，需要測(cè)定的時(shí)間會(huì)長一些，甚至?xí)_(dá)到24小時(shí)以上。。。 至于取樣的時(shí)間，個(gè)人覺得不需要刨除，每次取樣速度要快，最好在超凈臺(tái)中操作，取完后可以先將菌液放入搖床再去測(cè)量。 每次取樣后發(fā)酵液肯定會(huì)減少，甚至到最后發(fā)酵液都被用掉，理論上講肯定會(huì)對(duì)結(jié)果有影響，但是個(gè)人覺得影響不會(huì)很大，應(yīng)該不會(huì)影響到生長曲線的繪制，畢竟只是大致確定一個(gè)生長時(shí)期，不需要確定具體的菌量。 種子液接種時(shí)期要看你試驗(yàn)?zāi)康�，我一般是在�?duì)數(shù)生長末期進(jìn)行接種。只要在對(duì)數(shù)期應(yīng)該就好。 |
4樓2015-04-20 10:25:09
zht930528
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3樓2015-04-19 17:39:44
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5樓2015-04-21 10:45:59
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