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[交流]
快速破碎大量酵母
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好些天前就有蟲友在問我破碎酵母的方法,也就今天才終于有空整理一下分享給大家(T口T忙成狗)~一直覺得自己破碎酵母的方法很普通(我們實(shí)驗(yàn)室的人都是這么做的→_→)也沒想到網(wǎng)上居然還沒什么人知道這個(gè)這么好用的方法。。。 其他方法破碎酵母都是有各種各樣的缺陷~大家懂的 不羅嗦,看招 裝備主要就是破碎珠+多樣品組織研磨機(jī) 這個(gè)方法適用于破碎樣品量多的情況~如果你的樣品是很難破碎的,比如真菌之類的,那就更應(yīng)該用這個(gè)方法了╮(╯▽╰)╭有前人指路就是這么爽~ 說到多樣品組織研磨機(jī),這是個(gè)神器。。因?yàn)槁犝f這個(gè)機(jī)子一般都是用來破碎動植物細(xì)胞的。。不知道是哪個(gè)師兄師姐開創(chuàng)了破碎酵母的先例,這個(gè)方法就這么誕生了~(好吧,我能說是我們實(shí)驗(yàn)室窮去借了人家的機(jī)子用么T口T)有錢沒錢的入手個(gè)國產(chǎn)的也足夠了~我們用的就是國產(chǎn)的,效果也是杠杠的~ 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備: 1. 破碎珠酸洗處理; 2. 預(yù)處理好的研磨管(我用的是2ml的EP管); 3. 冷凍好裝EP管的模塊(這個(gè)是跟多樣品組織研磨機(jī)配套的,我是把模塊放到液氮里浸泡~); 4. 試劑(PBS或trizol或其它buffer,根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩。我用的PBS~) 實(shí)驗(yàn)步驟: 1. 取酵母菌離心去上清; 2. 加入破碎珠和PBS溶液,將EP管放入冷凍好的模塊中; 3. 模塊放入研磨機(jī)中振蕩(振蕩參數(shù)根據(jù)不同的多樣品組織研磨機(jī)和酵母菌多少而定,我用的是上海凈信的機(jī)子,國產(chǎn)機(jī)~╮(╯▽╰)╭性價(jià)比相當(dāng)高了) 4. 離心取上清,檢測目的成分含量(酵母破碎程度),回收破碎珠。 注意事項(xiàng):如果沒有冷凍模塊的話,振蕩要每分鐘都停歇一會兒,防止升溫 |
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