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關松蔭《土壤酶及其研究法》中磷酸酶活測定中的一點困惑 已有2人參與
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在根據(jù)關松蔭的方法測磷酸酶活的時候,采用磷酸苯二鈉比色法1,實驗原理是根據(jù)苯酚與氯代二溴對苯醌亞胺試劑反應顯色,但是我按照觀松蔭方法實驗并沒顯色,做標準曲線時是一條水平線。求解釋,求解決方法。![]() ![]() |
銅蟲 (正式寫手)
銅蟲 (正式寫手)
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不是沒有酶活性。 根據(jù)關松蔭的方法,我測土壤磷酸酶的活性。采用磷酸苯二鈉比色法1.原理是磷酸苯二鈉在磷酸酶的酶促反應下產生酚,酚與顯色劑2,6-二溴苯醌氯酰亞胺反映顯色。做標準曲線時不同濃度的酚與顯色劑反應,顯色,比色,得到與濃度相應的吸光度值。現(xiàn)在的問題是在做標準曲線時,該有的顯色沒有,比色時,不同濃度的酚溶液,吸光度值一樣。所以樣品測量就進行不下去。 之后我又用了關松蔭的磷酸苯二鈉比色法二,主要區(qū)別就是顯色劑改了,在做標準曲線時,顯色明顯,但是比色時吸光度變化很快,因而測出的值沒有意義。在較長一段時間內(一天),顏色變化從紅變黃再變綠。 這是我畢業(yè)論文的一部分,都快愁死了,很需要幫助,請前輩賜教。 |
銅蟲 (正式寫手)
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