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日光海銅蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
Red敲除!求含sacB質(zhì)粒和卡那抗性質(zhì)粒 已有2人參與
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如題,最近小弟做Red敲除,用上海大學(xué)一教授贈(zèng)與的pEX18Ap擴(kuò)sacB-bla打靶片段卻怎么也P不出來(lái),已經(jīng)做了兩個(gè)月了還是木有結(jié)果 。結(jié)果用質(zhì)粒轉(zhuǎn)化DH5α后在15%蔗糖LB上都長(zhǎng)出來(lái)了 。。。懷疑質(zhì)?赡芩湾e(cuò)了。所以想自己用overlap PCR將sacB和卡那霉素抗性片段連接到一起。但缺少sacB質(zhì)粒。求含sacB的pEX18Tc、pEX18Gm、pEX18Ap或pCVD442中的任何一種,若有卡那抗性的質(zhì)粒一并求助吧。目前實(shí)驗(yàn)室自己只有pRKaraRed和一些pMD18T等常規(guī)質(zhì)粒,如需要可交換互助。 |

鐵桿木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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