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tianlizi新蟲 (初入文壇)
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怎樣從中藥中分離出黃酮類化合物？ 已有5人參與
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黃酮類化合物的提取分離常用的方法，洗脫液和層析液的配比，有沒有專業(yè)的，很急得 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
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【答案】應(yīng)助回帖
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黃酮化合物 隨結(jié)構(gòu)中含糖部分多少分為脂溶性（苷元）和水溶性部分，你可以用70%乙醇回流提取，提取后濃縮回收乙醇，之后水-醋酸乙酯進(jìn)行萃取，水層主要是黃酮苷類成分，醋酸乙酯部分為苷元部分成分，你可以將這兩部分干燥后，初步進(jìn)行下抗氧化活性研究，看看這兩部分那部分抗氧化活性比較高。 如果水層部分活性較高，重點(diǎn)研究水層部分，將水層部分用大孔樹脂純化，分別用水-30%乙醇-50%乙醇-70%乙醇-95%乙醇洗脫，之后你可以將不同洗脫部位做下抗氧化研究，如果50%乙醇活性高作為重點(diǎn)研究部分，可將該部分干燥后，用甲醇溶解，之后100~200目硅膠進(jìn)行拌樣（將樣品吸附在硅膠上，此部分硅膠不能用太少，如果上樣黏度過大，可能在洗脫過程中發(fā)生堵塞柱子），我一般愿意用氯仿-甲醇-水系統(tǒng)，梯度可以從8:2:0.2, 7:3:0.5,6:4:1,5:5:1 這幾個(gè)梯度洗脫，我個(gè)人覺得既然是水溶性的，沒必要用氯仿-甲醇 99:1這樣的低洗脫溶劑洗脫硅膠柱，收集硅膠洗脫流分，干燥，并點(diǎn)薄層板，將TLC行為一致的流分合并，合并流分你可以選擇繼續(xù)硅膠柱層析，或是用SephadexLH-20純化，流動(dòng)相為MeOH（我不習(xí)慣用MeOH-H2O系統(tǒng)），流速要慢，之后一步就是ODS-C18純化，流動(dòng)相MeOH-H2O，比例自己根據(jù)實(shí)際情況摸索吧！收集流分，薄層檢測，合并TLC行為一致的流分，如果運(yùn)氣好，能析出結(jié)晶，如果分子結(jié)構(gòu)中連接糖數(shù)較多，不易結(jié)晶，就要用到制備液相分離，黃酮化合物是比較好純化到單體的化合物，得到單體，難度不大，希望樓主要有信心。 至于最初乙酸乙酯萃取部分，可以將乙酸乙酯回收至干燥，甲醇溶解過濾后，硅膠柱色譜純化，過程同上，進(jìn)一步也是應(yīng)用SephadexLH-20（根據(jù)極性，可能用到MeOH-氯仿 1:1系統(tǒng)）、ODS-C18純化、制備液相純化。  |
10樓2015-05-29 16:02:32
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3樓2015-05-28 10:45:51
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7樓2015-05-29 09:44:03
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9樓2015-05-29 13:13:47
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