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[交流]
不小心被紫外照射后的DNA，有什么補(bǔ)救方法嗎？？急求！ 已有9人參與
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之前做的大批量的DNA實(shí)驗(yàn)。有次不小心放置在紫外燈下一會(huì)兒，自從那次之后，再做pcr跑電泳，均無(wú)條帶。有時(shí)拿幾個(gè)DNA樣本做實(shí)驗(yàn)，會(huì)有不太明顯的條帶，但遠(yuǎn)沒(méi)有之前的亮度了。 請(qǐng)教一下各位大神，有沒(méi)有什么辦法可以挽救這種現(xiàn)狀？？如果我下次提高pcr體系中所加DNA的量，會(huì)不會(huì)跑出的條帶亮度效果會(huì)好一些？？ 自從被紫外照射后，做的pcr結(jié)果很不穩(wěn)定，有時(shí)會(huì)有幾個(gè)條帶，但有時(shí)基本什么都沒(méi)有。我的DNA樣本量很大，接近100例，所以如果再重新提取的話，要耗費(fèi)極大的人力和時(shí)間。 求大神指點(diǎn)一二��！不勝感激！！ |
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9樓2015-06-02 08:24:44
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luwei13566
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西門(mén)吹雪170: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-06-02 23:12:56
西門(mén)吹雪170: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-06-02 23:12:56
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1 你的樣品是基因組？100來(lái)個(gè)樣品難道都被紫外線照過(guò)了？為什么放紫外線下�。繕悠肥窃趺礃颖蛔贤饩�照的？樣品是怎樣存放的？ 2 在紫外線下照射了一會(huì)，具體是多長(zhǎng)時(shí)間？ 3 被照射到現(xiàn)在間隔了多長(zhǎng)時(shí)間？ 你的PCR擴(kuò)增效率降低很可能是嘧啶二聚體導(dǎo)致的，增大模板量會(huì)提高一些PCR產(chǎn)物，但是后續(xù)是測(cè)序構(gòu)建進(jìn)化樹(shù)，異元表達(dá)一類的實(shí)驗(yàn)這種擴(kuò)增產(chǎn)物都用不成，關(guān)鍵看你后續(xù)試驗(yàn)了，最好重新提了。 [ 發(fā)自小木蟲(chóng)客戶端 ] |
5樓2015-06-02 01:35:11
lxzk
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10樓2015-06-02 08:40:47
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