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[交流]
不小心被紫外照射后的DNA,有什么補(bǔ)救方法嗎??急求! 已有9人參與
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之前做的大批量的DNA實(shí)驗(yàn)。有次不小心放置在紫外燈下一會(huì)兒,自從那次之后,再做pcr跑電泳,均無條帶。有時(shí)拿幾個(gè)DNA樣本做實(shí)驗(yàn),會(huì)有不太明顯的條帶,但遠(yuǎn)沒有之前的亮度了。 請(qǐng)教一下各位大神,有沒有什么辦法可以挽救這種現(xiàn)狀??如果我下次提高pcr體系中所加DNA的量,會(huì)不會(huì)跑出的條帶亮度效果會(huì)好一些?? 自從被紫外照射后,做的pcr結(jié)果很不穩(wěn)定,有時(shí)會(huì)有幾個(gè)條帶,但有時(shí)基本什么都沒有。我的DNA樣本量很大,接近100例,所以如果再重新提取的話,要耗費(fèi)極大的人力和時(shí)間。 求大神指點(diǎn)一二!不勝感激! |
木蟲 (正式寫手)
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1 你的樣品是基因組?100來個(gè)樣品難道都被紫外線照過了?為什么放紫外線下?樣品是怎么樣被紫外線照的?樣品是怎樣存放的? 2 在紫外線下照射了一會(huì),具體是多長時(shí)間? 3 被照射到現(xiàn)在間隔了多長時(shí)間? 你的PCR擴(kuò)增效率降低很可能是嘧啶二聚體導(dǎo)致的,增大模板量會(huì)提高一些PCR產(chǎn)物,但是后續(xù)是測(cè)序構(gòu)建進(jìn)化樹,異元表達(dá)一類的實(shí)驗(yàn)這種擴(kuò)增產(chǎn)物都用不成,關(guān)鍵看你后續(xù)試驗(yàn)了,最好重新提了。 [ 發(fā)自小木蟲客戶端 ] |

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