 |
 |
 |
| 24小時熱門版塊排行榜 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 生物科學 » 蛋白電泳/WB » SDS-PAGE
| 查看: 1084 | 回復: 12 | ||
pqq226銅蟲 (初入文壇)
|
[求助]
SDS-PAGE 已有4人參與
|
|
|
濃縮膠5%,分離膠15%，電泳跑到一半多的位置出現(xiàn)彎曲，條帶不直，跑了好多次都是這種情況，樣品進行了離心然后取的上清，加樣量15微升。請各路大神指點一下，感謝感謝 20150602-6.jpg |
回復此樓» 猜你喜歡
求材料，環(huán)境專業(yè)調劑
已經有3人回復
-
335求調劑
已經有5人回復
-
求調劑
已經有7人回復
-
一志愿吉大化學322求調劑
已經有4人回復
-
環(huán)境學碩288求調劑
已經有8人回復
-
341求調劑(一志愿湖南大學070300)
已經有6人回復
-
一志愿北京化工大學 070300 學碩 336分 求調劑
已經有7人回復
-
299求調劑
已經有5人回復
-
306求0703調劑一志愿華中師范
已經有8人回復
-
一志愿河北工業(yè)大學0817化工278分求調劑
已經有11人回復
惡魔的左眼
木蟲 (正式寫手)
- 應助: 110 (高中生)
- 金幣: 2237.7
- 紅花: 20
- 帖子: 425
- 在線: 880.6小時
- 蟲號: 3705608
- 注冊: 2015-03-03
- 專業(yè): 蛋白質組學
【答案】應助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
pqq226: 金幣+3, ★有幫助 2015-06-10 09:54:02
感謝參與，應助指數(shù) +1
pqq226: 金幣+3, ★有幫助 2015-06-10 09:54:02
|
這個跑的還算可以的，通常膠跑到最后都或多或少都有些彎曲現(xiàn)象，不過，你的第7條帶跑的很好啊，這個加的是什么樣品？ 以下是對蛋白表達的SDS-PAGE一些建議： 1. 電泳凝膠濃度選擇不當。 2. 低于10Kd 的小分子蛋白質要用Tricine 膠。 3. 靠近前沿的電泳帶分辨率不佳。根據分子量與凝膠孔徑的關系，選擇適當濃度的凝膠。 4. 蛋白質樣品水解。注意除去蛋白質樣品的內源性的水解酶，不要反復凍融。 5. 電泳時間過長或過短。溴酚藍達到分離膠的底部即應該關閉電泳電源。 6. 緩沖溶液、SDS 都要新鮮配制。 7. 避免加樣過多，提高分辨率。小體積樣品可給出窄帶，加樣體積根據樣品濃度和凝膠厚度靈活掌握。一般上樣 體積為10-15uL（即2-10ug 蛋白質）。 8. 加熱變性后的蛋白質樣品要放置到室溫即電泳，不要久放，因為蛋白質的二硫鍵在高溫下可能是會斷開，但是 暴露于空氣中溫度降低會重新形成二硫鍵，而且可能在過久放置過程中蛋白質可能會再折疊，更不要扔到冰箱 里保存。 |
3樓2015-06-05 10:37:48
4樓2015-06-05 13:57:55
mataomatao
禁蟲 (正式寫手)
感謝參與，應助指數(shù) +1
|
本帖內容被屏蔽 |
2樓2015-06-03 20:00:35
hajierlove
銅蟲 (正式寫手)
- 應助: 44 (小學生)
- 金幣: 197.8
- 散金: 130
- 紅花: 15
- 沙發(fā): 1
- 帖子: 427
- 在線: 175.7小時
- 蟲號: 2346230
- 注冊: 2013-03-14
- 性別: MM
- 專業(yè): 生態(tài)學
5樓2015-06-06 14:59:09
alexkinglk
銀蟲 (初入文壇)
- 應助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 394.5
- 散金: 20
- 紅花: 2
- 帖子: 40
- 在線: 23小時
- 蟲號: 676620
- 注冊: 2008-12-17
- 性別: GG
- 專業(yè): 水文地質學(含地熱地質學)
6樓2015-06-06 16:34:25
pqq226
銅蟲 (初入文壇)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 148.1
- 帖子: 50
- 在線: 23.2小時
- 蟲號: 3860032
- 注冊: 2015-05-10
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結構與功能
7樓2015-06-10 09:41:45
pqq226
銅蟲 (初入文壇)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 148.1
- 帖子: 50
- 在線: 23.2小時
- 蟲號: 3860032
- 注冊: 2015-05-10
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結構與功能
8樓2015-06-10 09:47:38
pqq226
銅蟲 (初入文壇)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 148.1
- 帖子: 50
- 在線: 23.2小時
- 蟲號: 3860032
- 注冊: 2015-05-10
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結構與功能
9樓2015-06-10 09:52:07
10樓2015-07-30 18:57:27
相關版塊跳轉
我要訂閱樓主 pqq226 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 求材料，環(huán)境專業(yè)調劑 +3 | 18567500178 2026-03-18 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 335求調劑 +4 | yuyu宇 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 284求調劑 +3 | yanzhixue111 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
[考研] 070300化學求調劑 +8 | 苑豆豆 2026-03-20 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 工科0856求調劑 +5 | 沐析汀汀 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 接收2026碩士調劑(學碩+專碩) +4 | allen-yin 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 08工科 320總分 求調劑 +11 | 梨花珞晚風 2026-03-17 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 275求調劑 +6 | shansx 2026-03-22 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 305分求調劑（食品工程） +4 | Sxy112 2026-03-21 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工306 +4 | z1z2z3879 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿重慶大學085700資源與環(huán)境總分308求調劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[基金申請]
學校已經提交到NSFC，還能修改嗎？
 40+4
|
babangida 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 307求調劑 +3 | wyyyqx 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 二本跨考鄭大材料306英一數(shù)二 +3 | z1z2z3879 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿華南師大 070300（化學）304分求調劑 +3 | 0703武芊慧雪304 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 330求調劑 +4 | 小材化本科 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[論文投稿]
申請回稿延期一個月，編輯同意了。但系統(tǒng)上的時間沒變，給編輯又寫郵件了，沒回復
10+3
|
wangf9518 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工調劑 324分 +10 | llllkkkhh 2026-03-18 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 本科鄭州大學物理學院，一志愿華科070200學碩，346求調劑 +4 | 我不是一根蔥 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 【同濟軟件】軟件（085405）考研求調劑 +3 | 2026eternal 2026-03-18 | 3/150 |
|