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[求助]
MTT測細胞增殖應該選用幾個時間點？CCK-8呢？表征改性后鈦表面的生物相容性。 已有7人參與
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我是做鈦表面改性的，現(xiàn)在想表征其生物相容性，準備做細胞增殖實驗，但是不知道該選用哪一種�，F(xiàn)有兩種：MTT和CCK-8，但是很多疑問： 1、關于方法選擇：CCK-8方法比較便捷、靈敏，但是為什么現(xiàn)有的做生物材料的文獻中很少有用CCK-8的，是因為CCK-8不同時間長度的不能比較嗎？ 2、關于時間點選擇：文獻中做MTT的，有用1個,2個還有3-5個時間點的，這個應該怎么選擇呢？ 如果用CCK-8又需要做幾個時間點呢？ 3、無論哪種方法，一般需要重復幾次數(shù)據(jù)才算有效呢？ 本人學材料的，對生物方面了解甚少，最近因為這些問題很苦惱  ，又比較著急知道，查了很多查不到答案，還請各位前輩蟲友們賜教！真得很感謝�。�  |
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勿空
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4樓2015-06-14 11:16:13
【答案】應助回帖
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問題1，CCK-8的原理跟MTT相似，不同之處在于CCK-8法生成的formazan是水溶性的，不需要再吸出培養(yǎng)液加入有機溶劑溶解這個步驟，因此可以減少一定的誤差。其他優(yōu)點就是重復性優(yōu)于MTT；對細胞毒性小。但是CCK-8比MTT的價格要貴不少，所以一般來說，還是MTT法用的多。 問題2，沒有明白你說的時間點是什么，是測量周期么？這個應該和你選擇的細胞有關 問題3，材料一般要做3個重復樣，每個重復樣還要做3個MTT或者CCK-8 希望可以幫到你 |
2樓2015-06-12 06:19:26
xingxin02
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【答案】應助回帖
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第一點，如樓上所說MTT比較經(jīng)典，便宜，不過CCK-8也不是很貴（相對于動輒兩三千塊的抗體來說），CCK-8價格是幾百塊吧，CCK-8操作簡單，不需要溶解這一步，而且染色后更換培養(yǎng)基，細胞可以繼續(xù)養(yǎng)。 第二點，無論是MTT還是CCK-8，做細胞的增殖實驗（或是生長曲線），肯定是需要檢測多個時間點的，比如1天，3天，5天，7天。一個時間點的，那可能是細胞毒性實驗，比如說不同濃度藥物對細胞毒性的影響，加入不同濃度的藥物，培養(yǎng)24h（根據(jù)藥物情況，一般24h或者48h）。 第三點，每個孔至少有三個副孔。 |
3樓2015-06-12 14:47:47
xujiliang
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5樓2015-06-14 16:42:59
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