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如何封閉96孔板來降低蛋白結(jié)合到板子上的量
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| 最近一直在用ELISA的方法檢測原核表達(dá)的蛋白與細(xì)胞的結(jié)合情況,大概就是將細(xì)胞在96孔板上培養(yǎng)到confluence,然后再將原核表達(dá)的蛋白與細(xì)胞孵育,最后用該蛋白的相應(yīng)抗體作為一抗進(jìn)行標(biāo)記,最后用商業(yè)化的二抗標(biāo)記一抗,最后在酶標(biāo)儀上檢測蛋白的結(jié)合情況,但是問題就出現(xiàn)了,在將蛋白與細(xì)胞進(jìn)行孵育的時候,蛋白除了跟細(xì)胞可能結(jié)合外,還可以與96孔板進(jìn)行結(jié)合,請問如何處理96孔板才能減少這種非特異性結(jié)合呢。 |
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