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xiaolu2114新蟲 (初入文壇)
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[求助]
求助,藥動實驗,空白血漿中雜質峰干擾藥物測定。 已有5人參與
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小弟最近家兔藥動學實驗,半個月預實驗后,遇到了一個棘手的問題,嘗試了各種方法依舊無法解決,請有經驗的大神們指導指導。 主要問題是:血樣測定中,血漿中一個雜質和藥物的出峰時間一致,而且雜質峰面積較大,嚴重干擾血漿中藥物濃度的測定。血樣的處理方法為血漿液-液萃取后,氮氣吹干,甲醇復溶。嘗試了各種解決方法,依舊無果,1、改變流動相,最開始用甲醇-水的二元體系,內標和藥物峰形都很好,進樣空白血漿,發(fā)現(xiàn)一雜志峰保留時間和藥物保留時間基本一致,然后嘗試改變流動相比例,結果是不管怎么調,雜質的峰始終隨藥物的峰變動,沒法分開。2、加入乙腈,采用三元體系,依舊沒法把雜志和藥物分開。(就感覺藥物和雜質是同一個東西,不管怎么調,雜質的保留時間跟著藥物保留時間步調一致的變化)3,改變提取方法,最先使用正己烷-乙醚(1:1)提取,而后改用正己烷-乙酸乙酯(1:1)提取,最后嘗試先加和血漿等體積的1M NaOH,再用環(huán)己烷-異丙醇(96:4)提取,前面兩種提取方法處理后的樣品中雜質峰面積基本差不多,后一種方法感覺雜質峰有所減小,但內標和藥物的提取回收率很低很低。噢,還有一點,預實驗買了兩只兔子,發(fā)現(xiàn)不同兔子取出來的血漿中干擾雜質的峰面積相差很大,一只大到完全覆蓋藥物峰面積,一只干擾雜質峰面約為藥物定量限2——3倍。請大神們賜教 |

銅蟲 (初入文壇)

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新蟲 (初入文壇)

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