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xiaolu2114新蟲 (初入文壇)
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[求助]
求助，藥動實驗，空白血漿中雜質(zhì)峰干擾藥物測定。 已有5人參與
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小弟最近家兔藥動學(xué)實驗，半個月預(yù)實驗后，遇到了一個棘手的問題，嘗試了各種方法依舊無法解決，請有經(jīng)驗的大神們指導(dǎo)指導(dǎo)。 主要問題是：血樣測定中，血漿中一個雜質(zhì)和藥物的出峰時間一致，而且雜質(zhì)峰面積較大，嚴重干擾血漿中藥物濃度的測定。血樣的處理方法為血漿液-液萃取后，氮氣吹干，甲醇復(fù)溶。嘗試了各種解決方法，依舊無果，1、改變流動相，最開始用甲醇-水的二元體系，內(nèi)標(biāo)和藥物峰形都很好，進樣空白血漿，發(fā)現(xiàn)一雜志峰保留時間和藥物保留時間基本一致，然后嘗試改變流動相比例，結(jié)果是不管怎么調(diào)，雜質(zhì)的峰始終隨藥物的峰變動，沒法分開。2、加入乙腈，采用三元體系，依舊沒法把雜志和藥物分開。（就感覺藥物和雜質(zhì)是同一個東西，不管怎么調(diào)，雜質(zhì)的保留時間跟著藥物保留時間步調(diào)一致的變化）3，改變提取方法，最先使用正己烷-乙醚（1:1）提取，而后改用正己烷-乙酸乙酯（1:1）提取，最后嘗試先加和血漿等體積的1M NaOH，再用環(huán)己烷-異丙醇（96:4）提取，前面兩種提取方法處理后的樣品中雜質(zhì)峰面積基本差不多，后一種方法感覺雜質(zhì)峰有所減小，但內(nèi)標(biāo)和藥物的提取回收率很低很低。噢，還有一點，預(yù)實驗買了兩只兔子，發(fā)現(xiàn)不同兔子取出來的血漿中干擾雜質(zhì)的峰面積相差很大，一只大到完全覆蓋藥物峰面積，一只干擾雜質(zhì)峰面約為藥物定量限2——3倍。請大神們賜教  |
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2樓2015-07-19 09:22:54
change_clj
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4樓2015-07-19 22:02:04
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10樓2015-07-22 08:49:51
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