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geyihui新蟲 (小有名氣)
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[交流]
構(gòu)建突變庫
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| 最近在構(gòu)建突變庫，用電轉(zhuǎn)建庫，但是效率不高，初步懷疑是連接效率不高，載體與片段摩爾比1:5,22度2小時(shí)，再4 度過夜連接，請(qǐng)各位大神給點(diǎn)意見 |
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2樓2015-07-21 11:01:45
1332948571
新蟲 (初入文壇)
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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| 主要是兩個(gè)原因：1、感受態(tài)的轉(zhuǎn)化效率：至少要達(dá)到10的9次方，自己做能達(dá)到10的10次方甚至更高；做的時(shí)候注意菌的濃度OD在0.6-0.7之間，所用物品必須預(yù)冷，甘油最好用進(jìn)口的。2連接效率：進(jìn)口酶的連接效率沒有太大的區(qū)別，只是應(yīng)該用它的推薦條件中溫度較低的，時(shí)間較長的，連接效率會(huì)更高，連接產(chǎn)物必須純化。另外轉(zhuǎn)化的電壓、電容等也會(huì)影響轉(zhuǎn)化效率， |
3樓2015-07-21 16:03:40
geyihui
新蟲 (小有名氣)
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4樓2015-07-22 08:42:17
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