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firthzhang鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
電泳的marker出問題 已有1人參與
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最近50X的TAE電泳液用完了，自己按照takara的書上配制了1L，但是跑膠的marker一直如下圖所示，救命啊，看過帖子，查過文獻(xiàn)，從電泳儀到藥品都換了，還是不行，而且以前也配過，沒有問題，就是最近的出問題了，之前在跑膠時(shí)電壓90，電流34ma；現(xiàn)在是電壓90時(shí)電流就變成了100ma。之后把電泳液稀釋到0.5X使用電流下來了，但是marker還是老樣子，急救啊，后期都快癱瘓了！�。�！跪謝大神 不同實(shí)驗(yàn)室的膠粉.jpg 超純水配制電泳液，2000marker.jpg 在別人用別家tae自家膠粉跑電泳（7.21）.jpg 換了電泳液新配.jpg 搞不明白了.jpg |
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firthzhang
鐵蟲 (初入文壇)
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3樓2015-07-23 20:03:52
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【答案】應(yīng)助回帖
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firthzhang(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2015-07-24 10:22:49
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firthzhang(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2015-07-24 10:22:49
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之前在跑膠時(shí)電壓90，電流34ma；現(xiàn)在是電壓90時(shí)電流就變成了100ma。之后把電泳液稀釋到0.5X······ 你得知道問題出在哪，我們實(shí)驗(yàn)室跑膠恒壓100v，大概30min就好了，TAE、瓊脂糖膠自己配的，marker出來不會像你那樣拖好長。還有你跑膠別亂換參數(shù)，電泳液1xTAE，檢查這些如果都沒問題，那是marker不好用了，何不更換marker再試試？ |
2樓2015-07-23 19:36:18
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你的maker條帶雖然出問題，但是是很有規(guī)律的。你的maker的前兩條帶都基本正常，但是一旦到了第三條以后就隨著片段的長度增大而變化增大。也就是說小片段不出問題，而大片段出問題小片段和大片段在膠了的區(qū)別是找到問題的門。大片段受到的電場了大，但是隨之電場力的增加，阻力增加的程度也就更快，而所有的拖帶都是阻力和電場力的相互作用程度超過了一定范圍造成的。而阻力的增加程度趨勢，和你的帶型受影響程度趨勢是一致的。電流的改變，電壓的影響造成了阻力和電場力的不均衡浮動。大片段分開的慢，在未分開之前帶同一種電荷相互作用力時(shí)間愈長效果愈差。你打破了新的平衡，電流的變動也就打破力的平衡，片段愈大受影響愈大。個人認(rèn)為調(diào)動電壓降電流的效果會比調(diào)動電泳液降電流的效果好！在一個你想用的電泳液濃度下調(diào)動電壓，膠濃度來平衡。個人意見僅供參考。 |
4樓2015-07-23 21:02:54
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