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咪唑?qū)﹄x子交換層析的影響?包涵體蛋白純化過(guò)程中如何檢測(cè)蛋白濃度?
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在做蛋白純化的時(shí)候,NI柱純化后進(jìn)行離子交換層析,在這之間要進(jìn)行透析或者超濾濃縮,除了降低鹽離子濃度之外還會(huì)將咪唑除去,請(qǐng)問(wèn)咪唑?qū)﹄x子交換有影響嗎?如果直接進(jìn)行分子篩或者其他實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,還需將咪唑除去,咪唑?qū)Φ鞍子惺裁从绊憜幔?br />
純化包涵體蛋白的時(shí)候要用到尿素,沒(méi)法用nanodrop測(cè)量蛋白的濃度,怎么確定洗脫蛋白的濃度以及蛋白是否已經(jīng)完全從柱上洗脫下來(lái)?可溶蛋白用考馬斯亮藍(lán)G-250進(jìn)行檢測(cè),包涵體蛋白是否也可以?尿素會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果嗎? 希望知道的大牛給予解答!謝謝! |
專(zhuān)家顧問(wèn) (知名作家)
生物大分子降解酶
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