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咪唑?qū)﹄x子交換層析的影響?包涵體蛋白純化過程中如何檢測蛋白濃度?
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在做蛋白純化的時候,NI柱純化后進行離子交換層析,在這之間要進行透析或者超濾濃縮,除了降低鹽離子濃度之外還會將咪唑除去,請問咪唑?qū)﹄x子交換有影響嗎?如果直接進行分子篩或者其他實驗的時候,還需將咪唑除去,咪唑?qū)Φ鞍子惺裁从绊憜幔?br />
純化包涵體蛋白的時候要用到尿素,沒法用nanodrop測量蛋白的濃度,怎么確定洗脫蛋白的濃度以及蛋白是否已經(jīng)完全從柱上洗脫下來?可溶蛋白用考馬斯亮藍G-250進行檢測,包涵體蛋白是否也可以?尿素會影響檢測結果嗎? 希望知道的大牛給予解答!謝謝! |
專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
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