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[交流]
DNA凝膠電泳
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小弟用的是變性聚丙烯酰胺凝膠分離小于50個堿基的單鏈DNA，丙烯酰胺濃度20%， 100V電壓，跑2-3h。發(fā)現(xiàn)DNA條帶非常弱，基本看不出堿基，但是marker非常清晰（Low MW DNA Marker，25, 50, 75, 100, 150, 200, 300, 400, 500 bp）。 請問：1，上樣的DNA的濃度是多少？開始用60nM沒有做條帶來，后來用大濃度，大約300nM，還是沒有條帶，非常弱。 2，需要1500V預(yù)電泳嗎，我沒有進(jìn)行這一步。 3，我做的實(shí)驗(yàn)條件有沒有什么問題？ 4，50個單鏈的DNA跑出的條帶是對應(yīng)于marker的25bp還是50bp？ 完全互補(bǔ)配對的雙鏈DNA，每條鏈都是50個堿基，跑出的條帶對應(yīng)的是50bp還是100bp，謝謝！ 1.jpg |
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