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xiaopang-2新蟲 (初入文壇)
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[交流]
緊急求助,CS系列擬南芥突變體純合鑒定引物設(shè)計(jì)問(wèn)題
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最近在Tair網(wǎng)站上購(gòu)買了三個(gè)擬南芥突變體,序列號(hào)為CS8539,CS8540,CS6505,不知哪位高手能指教一下如何設(shè)計(jì)引物鑒定純合,看到網(wǎng)上有人說(shuō)CS系列不用鑒定,但是發(fā)現(xiàn)每種突變體的苗子的表型都有不一致的,應(yīng)該是有必要做一下鑒定吧!請(qǐng)懂這方面的高手不吝賜教,著急![]() |
新蟲 (初入文壇)
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??? |
至尊木蟲 (文學(xué)泰斗)
| CS系列突變體是點(diǎn)突變,根據(jù)TAIR網(wǎng)站上的信息找到突變位點(diǎn)及突變位點(diǎn)前后的序列,看突變的堿基是否在兩種基因型間產(chǎn)生酶切位點(diǎn)變化,如果有,那就設(shè)計(jì)引物做PCR,然后酶切,根據(jù)電泳結(jié)果判斷是否純合;如果沒(méi)有,使用dCAPS在線工具設(shè)計(jì)引物引入酶切位點(diǎn),后續(xù)方法和之前一樣。小木蟲中有很多類似的帖子,你可以查下,我之前也詳細(xì)回復(fù)過(guò)類似問(wèn)題,你自己查吧。 |
新蟲 (初入文壇)
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