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[求助]
關(guān)于復(fù)性:GSH/GSSG和二硫鍵折疊是什么關(guān)系? 已有1人參與
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求助。! 實驗室做復(fù)性會加入GSH和GSSG,一般比例是GSH/GSSG=10:1,這應(yīng)該是提供了一個相對還原的環(huán)境給蛋白,這個過程一般是4°攪拌過夜。而后透析PBS 2次,如果復(fù)性成功的話可以得到蛋白,有時蛋白會沉淀完。 這個GSH和GSSG的加入應(yīng)該是維持一定的氧還電位,幫助蛋白二硫鍵的折疊,但是二硫鍵的折疊應(yīng)該是在一個相對氧化的環(huán)境比較好。所以應(yīng)該是GSSG>GSH。但是不少資料上看的都是GSH>GSSG ![]() 有點搞糊涂了。加入GSH和GSSG的過程是蛋白質(zhì)折疊的過程嗎?還是透析PBS的過程才是折疊的過程。真的暈了。 |
至尊木蟲 (正式寫手)

至尊木蟲 (正式寫手)
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嗯,你說的表達(dá)過程中加入GSSG和GSH,我認(rèn)為如果是可溶表達(dá)的話是有意義的,如果是包涵體表達(dá)就沒什么用了;但是如果是可溶表達(dá)的話,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中本來就有GSSG,如果是為了促進(jìn)二硫鍵形成的話,實在是沒有必要,我覺得可能還是想起到一定的延緩左右。 |

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