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院士陳鐵蟲 (初入文壇)
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原核表達(dá)始終構(gòu)建載體不成功！�。�！ 已有4人參與
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本人近幾個(gè)月一直在做原核表達(dá)可是怎么都構(gòu)建不出重組質(zhì)粒，我要表達(dá)的目的基因全序列1950bp，起初做TA克隆都是一次性完成，但是當(dāng)做表達(dá)切除信號肽加酶切位點(diǎn)時(shí)，片段大小約1900bp怎么都連不上表達(dá)載體，當(dāng)實(shí)驗(yàn)室的師兄說先把片段連入T載體，再連表達(dá)載體，可是這時(shí)怎么都連不少T載體了，按理來說，片段變小了應(yīng)該更好連才是呀，可是怎么都沒連上每次連接都有算載體與目的DNA的質(zhì)量比，就是1:3～1:8�？墒蔷退氵@樣還是沒有的心好累，看不到前方的曙光，跪求木蟲吧大神指點(diǎn)迷津，愿天下好人一生平安�。。� [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
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2樓2015-08-11 08:19:47
jinxuan0904
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