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院士陳鐵蟲 (初入文壇)
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原核表達(dá)始終構(gòu)建載體不成功。。! 已有4人參與
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本人近幾個(gè)月一直在做原核表達(dá)可是怎么都構(gòu)建不出重組質(zhì)粒,我要表達(dá)的目的基因全序列1950bp,起初做TA克隆都是一次性完成,但是當(dāng)做表達(dá)切除信號(hào)肽加酶切位點(diǎn)時(shí),片段大小約1900bp怎么都連不上表達(dá)載體,當(dāng)實(shí)驗(yàn)室的師兄說先把片段連入T載體,再連表達(dá)載體,可是這時(shí)怎么都連不少T載體了,按理來說,片段變小了應(yīng)該更好連才是呀,可是怎么都沒連上每次連接都有算載體與目的DNA的質(zhì)量比,就是1:3~1:8?墒蔷退氵@樣還是沒有的心好累,看不到前方的曙光,跪求木蟲吧大神指點(diǎn)迷津,愿天下好人一生平安。! [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
木蟲 (正式寫手)
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