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喜自然果凍新蟲(chóng) (初入文壇)
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Taqman探針?lè)≧T-PCR的實(shí)驗(yàn)體系實(shí)驗(yàn)步驟哪位大神能夠發(fā)一下�。� 已有4人參與
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網(wǎng)上找的基本都是燃料法的，探針?lè)ǖ囊仓皇且恍┰恚?img src="https://muchongimg.xmcimg.com/data/emuch_bbs_images/smilies/cry.gif" align="absmiddle" border="0"> 我想要實(shí)際實(shí)驗(yàn)的體系、步驟的，哪位大牛能發(fā)一下 |
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2樓2015-08-15 00:41:26
helios_hj
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3樓2015-08-15 10:18:00
喜自然果凍
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4樓2015-08-17 08:36:11
vivd娟
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6樓2015-08-18 15:42:55
喜自然果凍
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7樓2015-08-25 10:34:53
喜自然果凍
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8樓2015-08-25 10:38:02
lcree
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9樓2018-09-21 13:57:03
【答案】應(yīng)助回帖
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基本步驟：1、 目的基因（DNA和mRNA）的查找和比對(duì)； 2、 引物、探針的設(shè)計(jì)； 3、 引物探針的合成； 4、 反應(yīng)體系的配制； 5、 反應(yīng)條件的設(shè)定； 6、 反應(yīng)體系和條件的優(yōu)化； 7、 熒光曲線和數(shù)據(jù)分析； 8、 標(biāo)準(zhǔn)品的制備； Biodai Taqman 探針設(shè)計(jì) 一般設(shè)計(jì)原則： 探針位置盡可能地靠近上游引物； 探針長(zhǎng)度通常在25－35bp，Tm值在65－70℃，通常比引物TM高5－10℃，GC含量在40%－70%。 探針的5’端應(yīng)避免使用堿基G。 整條探針中，堿基C的含量要明顯高于G的含量。 為確保引物探針的特異性，最好將設(shè)計(jì)好的序列在blast中核實(shí)一次，如果發(fā)現(xiàn)有非特異性互補(bǔ)區(qū)，建議重新設(shè)計(jì)引物探針。 |
10樓2019-02-19 08:43:22
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