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baotao099木蟲 (正式寫手)
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[求助]
采用2,4-二硝基苯肼法測定水果中抗壞血酸的時(shí)候?yàn)槭裁雌叫薪M的數(shù)據(jù)差距很大？ 已有1人參與
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1、我測得所有平行組數(shù)據(jù)都相差很大，這是哪里出問題了呢？ 2、最后加硫酸的時(shí)候，以及反應(yīng)30min是不是要很精確啊，我是5個(gè)樣品一起做的，會(huì)不會(huì)影響很大？ 3、還有一組的吸光值，空白都比樣品要大，好奇怪 4、在測得標(biāo)準(zhǔn)曲線的時(shí)候，空白是只要一個(gè)水呢，還是每組濃度都做一個(gè)空白？ |
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mixi113
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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baotao099: 金幣+50, ★★★★★最佳答案 2015-08-18 11:15:47
sytucom: 金幣+2, 回帖很精彩 2015-08-18 11:38:56
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1、所有平行組數(shù)據(jù)差異較大，主要是操作的問題吧。 （1）移液管、吸量管或者移液槍的使用是否正確，這個(gè)會(huì)影響數(shù)據(jù)結(jié)果，但不會(huì)使數(shù)據(jù)差異太大； （2）加酸后是否完全混勻，這一步往往會(huì)忽略，覺得在規(guī)定時(shí)間里保持冰浴狀態(tài)加酸就可以了，但是加酸的時(shí)候混勻力度不夠，使得呈色反應(yīng)不完全，從而產(chǎn)生較大的數(shù)據(jù)差異。 （3）每個(gè)平行樣的呈色反應(yīng)時(shí)間沒有控制好，有的測定時(shí)反應(yīng)時(shí)間30min，但是有的測定時(shí)反應(yīng)時(shí)間已經(jīng)40min了，這樣也會(huì)引起較大的誤差。 2、加酸的時(shí)間不需要太準(zhǔn)確，大致在一分鐘左右即可；反應(yīng)時(shí)間要控制嚴(yán)格一些；由于測定時(shí)樣品較多，樓主有5個(gè)樣品，也不少了，建議加酸時(shí)，拉開時(shí)間差，便于后面測定吸光度。我的操作習(xí)慣是加酸后，確�；靹蚝笥涗浄磻�(yīng)時(shí)間；一個(gè)樣品的加酸操作總共需要3min左右，從而每個(gè)樣品保持了3min的時(shí)間差，在測定吸光度的時(shí)候不至于手忙腳亂。 3、“空白的吸光值都比樣品要大”，這個(gè)情況在沒有誤操作的前提下，有可能活性炭有些問題。很多蟲友就是因?yàn)榛钚蕴康膯栴}，試驗(yàn)結(jié)果一直很糟糕，這里推薦使用國藥集團(tuán)的分析純顆粒狀活性炭。但是如果你的其他組都很正常，初步估計(jì)是誤操作。 4、首先，標(biāo)曲的空白不是水，而是相對應(yīng)濃度的VC溶液，因此每組濃度都做一個(gè)空白。 |
2樓2015-08-18 10:29:12
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