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baotao099木蟲 (正式寫手)
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[求助]
采用2,4-二硝基苯肼法測定水果中抗壞血酸的時候為什么平行組的數(shù)據(jù)差距很大？ 已有1人參與
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1、我測得所有平行組數(shù)據(jù)都相差很大，這是哪里出問題了呢？ 2、最后加硫酸的時候，以及反應(yīng)30min是不是要很精確啊，我是5個樣品一起做的，會不會影響很大？ 3、還有一組的吸光值，空白都比樣品要大，好奇怪 4、在測得標準曲線的時候，空白是只要一個水呢，還是每組濃度都做一個空白？ |
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mixi113
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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sytucom: 金幣+2, 回帖很精彩 2015-08-18 11:38:56
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1、所有平行組數(shù)據(jù)差異較大，主要是操作的問題吧。 （1）移液管、吸量管或者移液槍的使用是否正確，這個會影響數(shù)據(jù)結(jié)果，但不會使數(shù)據(jù)差異太大； （2）加酸后是否完全混勻，這一步往往會忽略，覺得在規(guī)定時間里保持冰浴狀態(tài)加酸就可以了，但是加酸的時候混勻力度不夠，使得呈色反應(yīng)不完全，從而產(chǎn)生較大的數(shù)據(jù)差異。 （3）每個平行樣的呈色反應(yīng)時間沒有控制好，有的測定時反應(yīng)時間30min，但是有的測定時反應(yīng)時間已經(jīng)40min了，這樣也會引起較大的誤差。 2、加酸的時間不需要太準確，大致在一分鐘左右即可；反應(yīng)時間要控制嚴格一些；由于測定時樣品較多，樓主有5個樣品，也不少了，建議加酸時，拉開時間差，便于后面測定吸光度。我的操作習(xí)慣是加酸后，確�；靹蚝笥涗浄磻�(yīng)時間；一個樣品的加酸操作總共需要3min左右，從而每個樣品保持了3min的時間差，在測定吸光度的時候不至于手忙腳亂。 3、“空白的吸光值都比樣品要大”，這個情況在沒有誤操作的前提下，有可能活性炭有些問題。很多蟲友就是因為活性炭的問題，試驗結(jié)果一直很糟糕，這里推薦使用國藥集團的分析純顆粒狀活性炭。但是如果你的其他組都很正常，初步估計是誤操作。 4、首先，標曲的空白不是水，而是相對應(yīng)濃度的VC溶液，因此每組濃度都做一個空白。 |
2樓2015-08-18 10:29:12
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