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zeroon木蟲 (正式寫手)
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[求助]
做亞細(xì)胞定位，主要是定位液泡，請(qǐng)問(wèn)融合蛋白表達(dá)載體應(yīng)該如何構(gòu)建呢 已有2人參與
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看到文獻(xiàn)中，液泡中的的蛋白酶——羧肽酶，常作為marker蛋白定位，既給這個(gè)蛋白融合一段gfp，然后在細(xì)胞內(nèi)即可定位液泡的位置。 但是找了好多文獻(xiàn)，都沒(méi)具體寫清楚分子構(gòu)建那地方是怎么樣的。 我應(yīng)該在羧肽酶基因的后面直接跟著加上gfp序列呢，還是中間隔開幾個(gè)序列再加？看到這篇文獻(xiàn)Visualization of vacuoles in Aspergillus oryzae by expression of CPY–EGFP。 里面提到First,the CPY–EGFP expression plasmid was constructed to constitutively express CPY–EGFP fusion protein,which contains six amino acids between CPY and EGFP,under A. oryzae pgkA promoter,which is a constitutively expressing strong promoter of 3-phosphoglycerate kinase gene。 我覺(jué)得好奇怪啊，為什么在CPY和EGFP之間加入6個(gè)氨基酸呢？而且這篇文章通篇也沒(méi)寫清楚到底這6個(gè)氨基酸是什么？ 求做過(guò)相關(guān)研究的大神給與指導(dǎo)，不慎感激。 |
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4樓2015-08-19 14:38:08
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