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做 western blot 的 GAPDH 內(nèi)參,總有雜帶 已有2人參與
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| 已經(jīng)做了一個多月的 GAPDH 內(nèi)參,總是有雜帶,我用的是 bioworlde 品牌的一抗,說明書上建議的濃度是 1:5000—1:15000。我第一次做的時候是用 1:5000,結(jié)果是有明顯的雜帶,而且雜帶和我要的條帶矮得很近;第二次做是 1:7000,雜帶明顯且與所要條帶距離很近;第三次,重新配置一抗,換了一組樣,其他條件和前兩次一樣,條帶表帶效果不好,但是雜帶沒有了;從第四次開始,次次出現(xiàn)雜帶,而且第四次我的樣品和方法與第三次相同。我試了很多方法,比如說增加濃縮膠、加大封閉時間、用封閉液配置一抗,單仍然有雜帶......求助各位大神,怎樣才能解決,我今年研一剛結(jié)束,剛做了一年western,望幫助QAQ |
鐵蟲 (初入文壇)

版主 (著名寫手)
己所不欲,勿施于人


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