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alsaith新蟲 (初入文壇)
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做 western blot 的 GAPDH 內(nèi)參，總有雜帶 已有2人參與
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| 已經(jīng)做了一個多月的 GAPDH 內(nèi)參，總是有雜帶，我用的是 bioworlde 品牌的一抗，說明書上建議的濃度是 1:5000—1:15000。我第一次做的時候是用 1:5000，結(jié)果是有明顯的雜帶，而且雜帶和我要的條帶矮得很近；第二次做是 1:7000，雜帶明顯且與所要條帶距離很近；第三次，重新配置一抗，換了一組樣，其他條件和前兩次一樣，條帶表帶效果不好，但是雜帶沒有了；從第四次開始，次次出現(xiàn)雜帶，而且第四次我的樣品和方法與第三次相同。我試了很多方法，比如說增加濃縮膠、加大封閉時間、用封閉液配置一抗，單仍然有雜帶......求助各位大神，怎樣才能解決，我今年研一剛結(jié)束，剛做了一年western，望幫助QAQ |
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fuyuandj86
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5樓2015-08-27 15:25:20
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