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cherryfyx新蟲 (初入文壇)
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稀釋涂布計(jì)數(shù)菌落的時(shí)候是怎么稀釋混勻的? 已有3人參與
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| 我之前做稀釋涂布都很正常,可是最近涂布的平板總是不長菌,即使一個(gè)樣品涂8個(gè)平行也都不長菌,很奇怪,期初懷疑是稀釋用振蕩器沒有混勻。后來改用槍吹吸20次,可還是不行,真的不明白了,大家稀釋混勻的到時(shí)候都是怎么混勻的啊 |
金蟲 (小有名氣)
新蟲 (小有名氣)
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新蟲 (小有名氣)
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畫線培養(yǎng)然后溶解到生理鹽水中當(dāng)作的原菌液么?樓主請(qǐng)先確認(rèn)這種細(xì)菌在生理鹽水中是否會(huì)存活,換成無菌蒸餾水試試。而且,樓主把原菌液稀釋1,2,4,8,16倍后再做培養(yǎng)基涂布,只有稀釋8倍的涂布后培養(yǎng)基上有菌,其余的都沒有?8倍稀釋原液后長出的菌落很多么,比如稀釋倍數(shù)低的菌落數(shù)不清,稀釋倍數(shù)高的有幾十幾百個(gè)?給樓主一些個(gè)人建議:1. 稀釋細(xì)菌的時(shí)候換成無菌蒸餾水或者PBS試一試;2. 確定原菌液的濃度,就是測過OD后,涂布到培養(yǎng)基,看看CFU究竟有多少;3. 原菌液稀釋1,2,4,16倍后的菌液,直接涂布到培養(yǎng)基上,不要做稀釋,看看1,2,4,16倍稀釋后的液體中,有沒有菌。4. 個(gè)人認(rèn)為不是振蕩混勻的問題。一些菌假如放置在營養(yǎng)匱乏的液體中較長時(shí)間,菌的細(xì)胞會(huì)發(fā)生變化,會(huì)存活,但是不會(huì)分裂生長。假如不研究長時(shí)間放置細(xì)菌的代謝變化,最好使用新培養(yǎng)的。 |
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