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尐然不同新蟲 (小有名氣)
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[求助]
細(xì)柱子保留時(shí)間太短問(wèn)題，如何選擇好的梯度洗脫？（有色譜圖） 已有4人參與
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用的是Sepax BR-C18 2.1*150mm 3um的細(xì)柱子，分離物質(zhì)的logP都很小(如下圖)，導(dǎo)致保留時(shí)間極短，而且沒(méi)有辦法分開，樣品用甲醇溶解的，流動(dòng)相用的也是甲醇和水，第一張色譜圖的梯度是甲醇的比例0-10min，50%-60%；10-20min,60%-100%; 20-35min, 100%. 問(wèn)題如下，求各位大神幫助！ 1.細(xì)柱子雖然柱壓確實(shí)高，不過(guò)這里用50%甲醇為流動(dòng)相時(shí)柱壓接近25MPa, 就算柱子受得了儀器也受不了了 2.前面的物質(zhì)logP較小，難以分開，而且進(jìn)單樣的時(shí)候（有機(jī)相比例較低60%-80%），柱效也很低，大概4000左右，不知道如何能夠提高前面物質(zhì)的柱效，并實(shí)現(xiàn)良好分離 3.后面的物質(zhì)需要在純有機(jī)相的條件下沖洗出來(lái)，如何能夠較合理的設(shè)置梯度洗脫，在保證物質(zhì)完全分離的情況下，縮短中間時(shí)間 4.后期還是打算為了柱壓和峰形考慮，換成乙腈為流動(dòng)相，那樣洗脫能力更強(qiáng)，樣品溶解是不是也得更改溶劑？有機(jī)相比例還需要降低？ 求助各位大神，謝謝！ PAEs.png 8 methanol tidu5-10 0.3 01.png 8 methanol tidu6-10 0.3 01.png |
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尐然不同
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3樓2015-08-30 10:52:00
hopestarzyf
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2樓2015-08-29 20:41:58
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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應(yīng)該是色譜條件的原因，可認(rèn)償試流動(dòng)相加緩沖鹽調(diào)一下pH值。另外注意檢查一下系統(tǒng)的死體和積。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2015-08-30 16:30:11
5樓2015-08-31 09:07:48
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