| 4 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1467 | 回復(fù): 3 | |||
千尋@德院銅蟲 (小有名氣)
|
[求助]
腹水硫酸銨沉淀后上proteinG 柱子需要透析除鹽嗎? 已有2人參與
|
|
問一下,腹水硫酸銨純化大家都用的什么方法呢?看到有除鹽的也有不除鹽的,向后面再接著用rotein G的柱子純化,是不是不需要硫酸銨這一步呢? 這個方法怎么樣,也是從網(wǎng)上看到的 1. 待提取樣品經(jīng)4℃或室溫離心13 000r/min(20000×g),30min,收集上清; 2. 取上清約20ml與等體積生理鹽水混合后,于攪拌下緩慢滴加40ml SAS,于4℃沉淀30min以上或過夜,使蛋白充分沉淀。 3. 13 000r/min,10min 4℃離心,棄上清。 4. 用12ml生理鹽水溶解沉淀,同步驟(2)滴加8ml SAS,4℃1h。 5. 重復(fù)步驟(3)離心,用13.3ml生理鹽水溶解沉淀, 6. 滴加6.6ml SAS,4℃1h; 7. 重復(fù)步驟(4)離心后所得沉淀物用少許鹽水溶解沉淀,并裝入透析袋。 8. 用大于20倍體積的PBS于4℃透析,更換透析液數(shù)次,可置-20℃保存或進一步純化。 |
專家顧問 (職業(yè)作家)
![]() |
專家經(jīng)驗: +702 |
銅蟲 (小有名氣)
|
你這純化好麻煩呀 你可以用磁珠法試試 腹水直接純化 不做做預(yù)處理 純度還好。我這有志昂生物的磁珠試用裝你可以試試 有需要聯(lián)系我吧 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
| 4 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿吉大化學(xué)322求調(diào)劑 +3 | 17501029541 2026-03-23 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 284求調(diào)劑 +3 | yanzhixue111 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
[考研] 生物學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +4 | 小羊睡著了? 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
[考研] 工科材料085601 279求調(diào)劑 +8 | 困于星晨 2026-03-17 | 10/500 |
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +3 | 余意卿 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
[考研] 材料與化工085600,總分304,本科有兩篇sci參與,求調(diào)劑 +4 | 幸運的醬醬 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
[考研] 315分,誠求調(diào)劑,材料與化工085600 +3 | 13756423260 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
[考研] 306求調(diào)劑 +5 | 來好運來來來 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
[考研] 260求調(diào)劑 +3 | 朱芷琳 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
[考研] 085600材料與化工306 +4 | z1z2z3879 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +3 | 呼呼?~+123456 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +4 | 妮妮ninicgb 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
[考研] 313求調(diào)劑 +4 | 肆叁貳壹22 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +3 | 哇呼哼呼哼 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
[考研] 材料與化工(0856)304求 B區(qū) 調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
[考研] 南昌大學(xué)材料專碩311分求調(diào)劑 +6 | 77chaselx 2026-03-20 | 6/300 |
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +6 | 曼殊2266 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +5 | 申子申申 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
[考研] 廣西大學(xué)家禽遺傳育種課題組2026年碩士招生(接收計算機專業(yè)調(diào)劑) +3 | 123阿標(biāo) 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
[考研] 生物學(xué)調(diào)劑招人。。 +3 | 山海天嵐 2026-03-17 | 4/200 |
|