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科研屌絲007新蟲 (小有名氣)
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[交流]
pGL3-Basic重組質粒構建問題 已有2人參與
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最近打算使用pGL3-Basic載體來研究啟動子轉錄活性,查閱相關文獻、論壇,其中存在幾點疑慮,希望有經驗的大神能夠指點一二: 首先,請問各位是如何確定啟動子區(qū)域的?通過什么網站,或者有什么特征序列?我現在手里有目的基因起始密碼子上游約600bp序列,網站預測到該區(qū)域內有一個CpG 島。 第二,是否有必要將第一外顯子序列也一并克隆到pGL3-Basic載體? 第三,擴增片段中的ATG密碼子是否會影響luc的表達? 歡迎大家參與討論,謝謝! |
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