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科研屌絲007新蟲 (小有名氣)
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[交流]
pGL3-Basic重組質(zhì)粒構(gòu)建問題 已有2人參與
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最近打算使用pGL3-Basic載體來研究啟動子轉(zhuǎn)錄活性，查閱相關(guān)文獻(xiàn)、論壇，其中存在幾點(diǎn)疑慮，希望有經(jīng)驗(yàn)的大神能夠指點(diǎn)一二： 首先，請問各位是如何確定啟動子區(qū)域的？通過什么網(wǎng)站，或者有什么特征序列？我現(xiàn)在手里有目的基因起始密碼子上游約600bp序列，網(wǎng)站預(yù)測到該區(qū)域內(nèi)有一個CpG 島。 第二，是否有必要將第一外顯子序列也一并克隆到pGL3-Basic載體？ 第三，擴(kuò)增片段中的ATG密碼子是否會影響luc的表達(dá)？ 歡迎大家參與討論，謝謝！ |
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2樓2015-12-23 13:32:16
3樓2017-04-13 19:25:07
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