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黃崇新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
Elisa抗原異常情況探討
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請(qǐng)教下大家,是否遇到過(guò)這種問(wèn)題,用抗原(重組蛋白)做標(biāo)曲,試劑盒為雙抗夾心法,在抗體對(duì)無(wú)誤的前提下,抗原做梯度,從5ug-62pg,在25ng前,信號(hào)都為最大值,而在下一個(gè)稀釋梯度(10ng),信號(hào)變?yōu)殛幮裕瑫r(shí)原裝的標(biāo)曲,陰陽(yáng)質(zhì)控?zé)o誤,但,單純加入PBS作為抗原,反應(yīng),OD能達(dá)到0.5.——大家覺(jué)得造成這樣的可能有哪些? 我的猜想:1.抗原的序列是錯(cuò)的 2.結(jié)合PBS,有0.5信號(hào),抗原體系也為PBS,是否更換體系,能有所改變 期待大家的猜想和推斷。 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)簡(jiǎn)圖 20150902 20150908 1 5ug ( + ) ( + ) 2 1ug ( + ) ( + ) 3 100ng ( + ) ( + ) 4 10ng 0.181 1.82 5 1ng 0.168 0.155 6 500pg 0.089 0.105 7 250pg 0.088 0.088 8 125pg 0.088 0.083 9 62.5pg 0.09 0.076 10 標(biāo)準(zhǔn)品A 0.083 0.072 11 標(biāo)準(zhǔn)品B 0.13 0.101 12 標(biāo)準(zhǔn)品C 0.195 0.154 13 標(biāo)準(zhǔn)品D 0.317 0.249 14 標(biāo)準(zhǔn)品E 0.726 0.63 15 標(biāo)準(zhǔn)品F 1.148 0.751 16 標(biāo)準(zhǔn)品G 1.469 1.194 17 陽(yáng)性質(zhì)控 1.004 0.752 18 陰性質(zhì)控 0.171 0.133 19 蒸餾水 0.271 0.203 20 蒸餾水 0.283 0.23 21 PBS 0.152 0.495 22 PBS 0.147 0.47 23 空白 0.155 0.131 24 空白 0.147 0.128 其中1-9為自制抗原,稀釋,數(shù)字濃度單位為XX/ml 1000ng ( + ) 100ng ( + ) 75ng ( + ) 50ng ( + ) 25ng ( + ) 0 0.06 陽(yáng)性對(duì)照 0.476 陰性對(duì)照 0.102 此數(shù)據(jù)同為抗原梯度稀釋。 |
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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