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Elisa抗原異常情況探討
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請教下大家，是否遇到過這種問題，用抗原（重組蛋白）做標(biāo)曲，試劑盒為雙抗夾心法，在抗體對無誤的前提下，抗原做梯度，從5ug-62pg，在25ng前，信號都為最大值，而在下一個稀釋梯度（10ng)，信號變?yōu)殛幮�，同時原裝的標(biāo)曲，陰陽質(zhì)控?zé)o誤，但，單純加入PBS作為抗原，反應(yīng)，OD能達到0.5.——大家覺得造成這樣的可能有哪些？ 我的猜想：1.抗原的序列是錯的 2.結(jié)合PBS，有0.5信號，抗原體系也為PBS，是否更換體系，能有所改變 期待大家的猜想和推斷。 實驗數(shù)據(jù)簡圖 20150902 20150908 1 5ug ( + ) ( + ) 2 1ug ( + ) ( + ) 3 100ng ( + ) ( + ) 4 10ng 0.181 1.82 5 1ng 0.168 0.155 6 500pg 0.089 0.105 7 250pg 0.088 0.088 8 125pg 0.088 0.083 9 62.5pg 0.09 0.076 10 標(biāo)準(zhǔn)品A 0.083 0.072 11 標(biāo)準(zhǔn)品B 0.13 0.101 12 標(biāo)準(zhǔn)品C 0.195 0.154 13 標(biāo)準(zhǔn)品D 0.317 0.249 14 標(biāo)準(zhǔn)品E 0.726 0.63 15 標(biāo)準(zhǔn)品F 1.148 0.751 16 標(biāo)準(zhǔn)品G 1.469 1.194 17 陽性質(zhì)控 1.004 0.752 18 陰性質(zhì)控 0.171 0.133 19 蒸餾水 0.271 0.203 20 蒸餾水 0.283 0.23 21 PBS 0.152 0.495 22 PBS 0.147 0.47 23 空白 0.155 0.131 24 空白 0.147 0.128 其中1-9為自制抗原，稀釋，數(shù)字濃度單位為XX/ml 1000ng ( + ) 100ng ( + ) 75ng ( + ) 50ng ( + ) 25ng ( + ) 0 0.06 陽性對照 0.476 陰性對照 0.102 此數(shù)據(jù)同為抗原梯度稀釋。 |
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feiyue122
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