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[交流]
做細菌的熒光定量PCR,SYBR GREEN I 染料,提取的是DNA,選擇什么內(nèi)參比較好?
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| 如題,GAPDH,β-actin 還是18s rRNA?這些內(nèi)參可以買到嗎?謝謝! |
木蟲之王 (文壇精英)

銀蟲 (正式寫手)
銀蟲 (正式寫手)
銀蟲 (正式寫手)
木蟲 (小有名氣)
此人有毒
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根據(jù)實驗的實際情況,不同組織、不同細胞、細胞的不同生理時期、不同的理化條件刺激等,查閱相關資料,選取三、四合適的內(nèi)參基因,做熒光定量PCR,先以CT值最小的那條基因作為內(nèi)參,其他幾條內(nèi)參基因與其相比,分析所得的比值,找出比值穩(wěn)定的幾條基因,比值穩(wěn)定說明該基因表達穩(wěn)定,適合作為理想的內(nèi)參。 也可用geNorm內(nèi)參分析軟件來選擇合適的內(nèi)參基因。 對于比較精確的實驗,最好采用兩種或兩種以上表達穩(wěn)定的基因作內(nèi)參,對每種內(nèi)參基因測得的基因表達變化求方差和平均值。 |

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