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sonny金蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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[交流]
關(guān)于轉(zhuǎn)染的一些問(wèn)題，求討論！
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目前在用Flp-In TRex-293做可誘導(dǎo)表達(dá)的穩(wěn)轉(zhuǎn)表達(dá)系，該細(xì)胞正常培養(yǎng)需要Zeocin和Blasticidin兩種選擇抗性維持，轉(zhuǎn)染進(jìn)外源重組質(zhì)粒后，定點(diǎn)插入后會(huì)導(dǎo)致Zeocin抗性消失，獲得Hygromycin B抗性，而B(niǎo)lasticidin抗性一直存在。 我的問(wèn)題是：在做轉(zhuǎn)染過(guò)程中，是否需要加入Blasticidin抗生素？？ |
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月曉寒
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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5樓2015-11-05 17:46:17
evangelina
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4樓2015-09-08 20:46:23
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
sonny: 金幣+1 2015-11-29 20:46:05
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
sonny: 金幣+1 2015-11-29 20:46:05
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我們轉(zhuǎn)染一般也不加抗性 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
6樓2015-11-05 22:26:19
18761615793
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
小蟲(chóng)
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
sonny: 金幣+1 2015-11-29 20:46:12
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
sonny: 金幣+1 2015-11-29 20:46:12
| 樓主要做什么轉(zhuǎn)染瞬時(shí)轉(zhuǎn)染還是要進(jìn)行穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系構(gòu)建，轉(zhuǎn)染這個(gè)過(guò)程是不需要抗性的，等轉(zhuǎn)染結(jié)束了換培養(yǎng)基可以加入抗性，穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選的話將目的基因整合到細(xì)胞自身的基因組上，樓主說(shuō)的定點(diǎn)插入導(dǎo)致抗性消失是否可以避免。。 |
7樓2015-11-09 17:04:40
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