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sonny金蟲 (著名寫手)
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[交流]
關(guān)于轉(zhuǎn)染的一些問題，求討論！
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目前在用Flp-In TRex-293做可誘導(dǎo)表達(dá)的穩(wěn)轉(zhuǎn)表達(dá)系，該細(xì)胞正常培養(yǎng)需要Zeocin和Blasticidin兩種選擇抗性維持，轉(zhuǎn)染進(jìn)外源重組質(zhì)粒后，定點(diǎn)插入后會(huì)導(dǎo)致Zeocin抗性消失，獲得Hygromycin B抗性，而Blasticidin抗性一直存在。 我的問題是：在做轉(zhuǎn)染過程中，是否需要加入Blasticidin抗生素？？ |
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18761615793
木蟲 (正式寫手)
小蟲
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sonny: 金幣+1 2015-11-29 20:46:12
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
sonny: 金幣+1 2015-11-29 20:46:12
| 樓主要做什么轉(zhuǎn)染瞬時(shí)轉(zhuǎn)染還是要進(jìn)行穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系構(gòu)建，轉(zhuǎn)染這個(gè)過程是不需要抗性的，等轉(zhuǎn)染結(jié)束了換培養(yǎng)基可以加入抗性，穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選的話將目的基因整合到細(xì)胞自身的基因組上，樓主說的定點(diǎn)插入導(dǎo)致抗性消失是否可以避免。。 |
7樓2015-11-09 17:04:40
evangelina
無(wú)蟲 (小有名氣)
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4樓2015-09-08 20:46:23
月曉寒
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5樓2015-11-05 17:46:17
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
sonny: 金幣+1 2015-11-29 20:46:05
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
sonny: 金幣+1 2015-11-29 20:46:05
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我們轉(zhuǎn)染一般也不加抗性 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2015-11-05 22:26:19
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