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mogana1991新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
黃瓜枯萎病菌尖孢鐮刀菌，怎么接種到PDA平板上，以及怎么感染黃瓜
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我是挑了菌，直接點(diǎn)到PDA平板上，但是最近老污染， 我用無(wú)菌水沖洗平板，制成孢子懸浮液，傷根法接種黃瓜幼苗（兩片真葉），現(xiàn)在已三天，無(wú)任何感病癥狀 求給出正確建議和指導(dǎo) |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
mogana1991: 金幣+6, 博學(xué)EPI+1 2015-11-30 20:54:08
mogana1991: 金幣+6, 博學(xué)EPI+1 2015-11-30 20:54:08
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不知道lz污染什么，是從什么上接種出來(lái)。 1、如果是帶病的植物樣本，首先得配置1/4的PDA，然后加入抗生素。接種前先對(duì)植物葉片進(jìn)行消毒，接種時(shí)盡量選取感病區(qū)域的樣品進(jìn)行轉(zhuǎn)接，及時(shí)觀察，發(fā)現(xiàn)單菌落就及時(shí)挑出，不要等一段時(shí)間后再轉(zhuǎn)接。從植物樣品中接出需要考慮到植物內(nèi)生菌，植物葉片表面微生物的污染。 2、如果是從保存菌株接出的話(huà)，那就要考慮保存的樣品是否有污染。如果是細(xì)菌污染，那么可以加入抗生素，如果抗生素不管用的話(huà)，可以在培養(yǎng)一段時(shí)間后采用三明治法將目標(biāo)菌株和污染細(xì)菌分離開(kāi)來(lái)。如果是真菌污染的話(huà)，把樣品用無(wú)菌水沖洗后，多次稀釋后涂平板，但要及時(shí)將單菌落挑出。 3、如果是從平板轉(zhuǎn)接時(shí)污染，相關(guān)操作可以參考2。 微生物操作的主要污染源就是細(xì)菌和真菌，細(xì)菌污染一般是因?yàn)槭褂玫牟牧蠝缇煌耆斐傻�，使用前�?yīng)嚴(yán)格滅菌。真菌污染一般是由于操作不當(dāng)污染的，一般都是孢子污染，比如說(shuō)平皿開(kāi)閉不夠迅速，導(dǎo)致雜菌孢子落入。所以避免真菌污染就要保證操作的快速準(zhǔn)確，有開(kāi)口的器皿，如平皿，試管，避免長(zhǎng)時(shí)間裸露在操作環(huán)境中。進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室，無(wú)論是在工作臺(tái)內(nèi)外，都要保證空氣流動(dòng)的穩(wěn)定，突然的氣流擾動(dòng)是最容易造成真菌污染的原因。 至于病原菌感染宿主，這個(gè)影響因素太多了，建議lz把每個(gè)操作環(huán)節(jié)進(jìn)行分類(lèi)，然后用正交的方法對(duì)每一種組合進(jìn)行一下驗(yàn)證，選出最適的接種和培養(yǎng)條件。 PS：很多文獻(xiàn)里的接種條件不一定適用lz的實(shí)驗(yàn)室，所以還得自己摸索。 |
2樓2015-09-10 10:10:56
mogana1991
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3樓2015-11-30 11:47:11
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4樓2015-11-30 11:51:04
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