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mogana1991新蟲 (初入文壇)
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[求助]
黃瓜枯萎病菌尖孢鐮刀菌，怎么接種到PDA平板上，以及怎么感染黃瓜
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我是挑了菌，直接點到PDA平板上，但是最近老污染， 我用無菌水沖洗平板，制成孢子懸浮液，傷根法接種黃瓜幼苗（兩片真葉），現(xiàn)在已三天，無任何感病癥狀 求給出正確建議和指導(dǎo) |
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mogana1991
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4樓2015-11-30 11:51:04
shuchiwsw
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
mogana1991: 金幣+6, 博學EPI+1 2015-11-30 20:54:08
mogana1991: 金幣+6, 博學EPI+1 2015-11-30 20:54:08
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不知道lz污染什么，是從什么上接種出來。 1、如果是帶病的植物樣本，首先得配置1/4的PDA，然后加入抗生素。接種前先對植物葉片進行消毒，接種時盡量選取感病區(qū)域的樣品進行轉(zhuǎn)接，及時觀察，發(fā)現(xiàn)單菌落就及時挑出，不要等一段時間后再轉(zhuǎn)接。從植物樣品中接出需要考慮到植物內(nèi)生菌，植物葉片表面微生物的污染。 2、如果是從保存菌株接出的話，那就要考慮保存的樣品是否有污染。如果是細菌污染，那么可以加入抗生素，如果抗生素不管用的話，可以在培養(yǎng)一段時間后采用三明治法將目標菌株和污染細菌分離開來。如果是真菌污染的話，把樣品用無菌水沖洗后，多次稀釋后涂平板，但要及時將單菌落挑出。 3、如果是從平板轉(zhuǎn)接時污染，相關(guān)操作可以參考2。 微生物操作的主要污染源就是細菌和真菌，細菌污染一般是因為使用的材料滅菌不完全造成的，使用前應(yīng)嚴格滅菌。真菌污染一般是由于操作不當污染的，一般都是孢子污染，比如說平皿開閉不夠迅速，導(dǎo)致雜菌孢子落入。所以避免真菌污染就要保證操作的快速準確，有開口的器皿，如平皿，試管，避免長時間裸露在操作環(huán)境中。進行實驗室，無論是在工作臺內(nèi)外，都要保證空氣流動的穩(wěn)定，突然的氣流擾動是最容易造成真菌污染的原因。 至于病原菌感染宿主，這個影響因素太多了，建議lz把每個操作環(huán)節(jié)進行分類，然后用正交的方法對每一種組合進行一下驗證，選出最適的接種和培養(yǎng)條件。 PS：很多文獻里的接種條件不一定適用lz的實驗室，所以還得自己摸索。 |
2樓2015-09-10 10:10:56
mogana1991
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3樓2015-11-30 11:47:11
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