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99蝸牛99新蟲 (小有名氣)
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[交流]
T克隆,質(zhì)粒連接,抓狂了! 已有2人參與
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首先PCR獲得了目的基因,之后嘗試將目的基因與載體雙酶切,然后用T4DNA連接酶16℃過夜連接,連接了很多次了,有的時候板上長菌很少,有的時候長菌很多,但菌落PCR驗證的時候都沒有目的條帶。。。 然后試著把目的基因先連接到T載體上,可是剛剛PCR驗證時,菌落PCR也沒有目的條帶,有些迷茫了,求前輩們指點。。。謝謝。。。 |
木蟲 (著名寫手)
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我也老遇到這種問題,但是,如果不是因為操作的錯誤的話,問題應(yīng)該還是出在連接或者載體上。因為有的時候載體不同,發(fā)現(xiàn)做出來的可能也不同。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
專家顧問 (正式寫手)
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新蟲 (正式寫手)
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