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99蝸牛99新蟲 (小有名氣)
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[交流]
T克隆，質(zhì)粒連接，抓狂了！ 已有2人參與
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首先PCR獲得了目的基因，之后嘗試將目的基因與載體雙酶切，然后用T4DNA連接酶16℃過(guò)夜連接，連接了很多次了，有的時(shí)候板上長(zhǎng)菌很少，有的時(shí)候長(zhǎng)菌很多，但菌落PCR驗(yàn)證的時(shí)候都沒(méi)有目的條帶。。。 然后試著把目的基因先連接到T載體上，可是剛剛PCR驗(yàn)證時(shí)，菌落PCR也沒(méi)有目的條帶，有些迷茫了，求前輩們指點(diǎn)。。。謝謝。。。 |
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
99蝸牛99: 金幣+1 2015-09-15 21:34:08
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
99蝸牛99: 金幣+1 2015-09-15 21:34:08
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我也老遇到這種問(wèn)題，但是，如果不是因?yàn)椴僮鞯腻e(cuò)誤的話，問(wèn)題應(yīng)該還是出在連接或者載體上。因?yàn)橛械臅r(shí)候載體不同，發(fā)現(xiàn)做出來(lái)的可能也不同。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2015-09-15 00:10:33
biostar2009
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7樓2015-09-15 10:38:35
8樓2015-09-15 10:49:13
kangaroo0513
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10樓2015-09-15 12:01:50
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3樓2015-09-15 09:17:28
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6樓2015-09-15 10:18:55
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9樓2015-09-15 10:57:06
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