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ynbymx新蟲 (初入文壇)
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[求助]
UCNP修飾DNA 已有1人參與
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之前發(fā)的沒人應(yīng)助，再發(fā)一遍，跪求大神指點(diǎn)。在PAA-UCNP上修飾NH2-DNA，主要參考了武大Wang等人的Aptamer biosensor based on fluorescence resonance energy transfer from upconverting phosphors to carbon nanoparticles for thrombin detection in human plasma[J]. Analytical chemistry, 2011, 83(21): 8130-8137.主要步驟如下： 1.5mg PAA-UCNP分散在2mLMES(10mM,PH5.5) 2.加入EDC ·HCl 0.8mg（2mM),NHS1.2mg(5mM),30℃緩慢振蕩30min或1h； 3.離心（這一步水洗和未水洗都嘗試過） 4.分散在2mL 含2.5μM NH2-DNA的HEPES buffer（10mM，PH7.2）； 5.30℃，反應(yīng)過夜； 6.離心，HEPES洗滌3次，最后分散在2mL Tris-HCl(10mM,PH7.4) 從表征結(jié)果上看，并沒有修飾成功。不知道是不是活化的時(shí)間不夠？EDC/NHS的比例有問題嗎？還是后面的偶聯(lián)有問題。 有木有做過類似的，希望可以給點(diǎn)建議，大謝！ |
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2樓2015-09-18 14:35:40
ynbymx
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3樓2015-09-18 17:07:40
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4樓2015-09-21 12:53:15
tansuanbei
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5樓2016-03-30 19:58:05
xiumubaiyu
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6樓2016-06-06 17:03:02
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7樓2016-06-27 18:27:50
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