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UCNP修飾DNA 已有1人參與
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之前發(fā)的沒人應助,再發(fā)一遍,跪求大神指點。在PAA-UCNP上修飾NH2-DNA,主要參考了武大Wang等人的Aptamer biosensor based on fluorescence resonance energy transfer from upconverting phosphors to carbon nanoparticles for thrombin detection in human plasma[J]. Analytical chemistry, 2011, 83(21): 8130-8137.主要步驟如下: 1.5mg PAA-UCNP分散在2mLMES(10mM,PH5.5) 2.加入EDC ·HCl 0.8mg(2mM),NHS1.2mg(5mM),30℃緩慢振蕩30min或1h; 3.離心(這一步水洗和未水洗都嘗試過) 4.分散在2mL 含2.5μM NH2-DNA的HEPES buffer(10mM,PH7.2); 5.30℃,反應過夜; 6.離心,HEPES洗滌3次,最后分散在2mL Tris-HCl(10mM,PH7.4) 從表征結(jié)果上看,并沒有修飾成功。不知道是不是活化的時間不夠?EDC/NHS的比例有問題嗎?還是后面的偶聯(lián)有問題。 有木有做過類似的,希望可以給點建議,大謝! |
銀蟲 (小有名氣)

禁蟲 (正式寫手)
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