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行板如歌金蟲 (小有名氣)
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[求助]
新手，求助一個(gè)問題，如何驗(yàn)證轉(zhuǎn)錄因子與目的基因互作？有哪些方法呢？ 已有3人參與
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| RT-qPCR實(shí)驗(yàn)篩選出了幾個(gè)差異表達(dá)的基因，對這幾個(gè)基因啟動(dòng)子區(qū)域分析，表明啟動(dòng)子區(qū)域含有一個(gè)能與ARF轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合的順式作用元件，但是用什么方法能驗(yàn)證ARF轉(zhuǎn)錄因子真的結(jié)合在該基因的啟動(dòng)子上呢？先前實(shí)驗(yàn)室只做到定量表達(dá)分析上，沒有做過驗(yàn)證，有什么方法能驗(yàn)證蛋白質(zhì)與DNA的結(jié)合呢？ |
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Neo2000
木蟲 (著名寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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行板如歌: 金幣+5, ★有幫助, 實(shí)驗(yàn)室沒有酵母體系，不知道有公司做這個(gè)沒有？ 2015-09-18 19:15:36
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行板如歌: 金幣+5, ★有幫助, 實(shí)驗(yàn)室沒有酵母體系，不知道有公司做這個(gè)沒有？ 2015-09-18 19:15:36
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做個(gè)酵母單雜就行 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2015-09-18 16:09:05
3樓2015-09-18 16:10:57
【答案】應(yīng)助回帖
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行板如歌: 金幣+5, ★有幫助, 送公司應(yīng)該選什么技術(shù)來測比較準(zhǔn)確呢？ 2015-09-18 19:16:33
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行板如歌: 金幣+5, ★有幫助, 送公司應(yīng)該選什么技術(shù)來測比較準(zhǔn)確呢？ 2015-09-18 19:16:33
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送公司把，估計(jì)一兩k就出來了，酵母雜交實(shí)驗(yàn)要建酵母體系，很麻煩，凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)要用到放射性同位素。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2015-09-18 16:14:56
wangtaodluf
木蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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行板如歌: 金幣+5, ★有幫助, 謝謝，我研究下chip的操作流程 2015-09-18 19:17:32
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行板如歌: 金幣+5, ★有幫助, 謝謝，我研究下chip的操作流程 2015-09-18 19:17:32
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chip應(yīng)該是目前最直接的證明 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2015-09-18 16:54:30
huagnshaowu
禁蟲 (正式寫手)
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本帖內(nèi)容被屏蔽 |
6樓2015-09-18 18:24:25
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7樓2015-09-18 18:36:43
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這個(gè)不清楚，我們課題組去年也遇到這問題，最后定的做酵母，因?yàn)槲覀兊霓D(zhuǎn)錄因子還設(shè)計(jì)到與其他蛋白形成異二聚體的問題，所以單雜雙雜一起做了，就沒有考慮免疫共沉淀和凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
8樓2015-09-19 06:36:19
9樓2015-09-19 11:53:13
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