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行板如歌金蟲 (小有名氣)
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[求助]
新手，求助一個問題，如何驗證轉(zhuǎn)錄因子與目的基因互作？有哪些方法呢？ 已有3人參與
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| RT-qPCR實驗篩選出了幾個差異表達(dá)的基因，對這幾個基因啟動子區(qū)域分析，表明啟動子區(qū)域含有一個能與ARF轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合的順式作用元件，但是用什么方法能驗證ARF轉(zhuǎn)錄因子真的結(jié)合在該基因的啟動子上呢？先前實驗室只做到定量表達(dá)分析上，沒有做過驗證，有什么方法能驗證蛋白質(zhì)與DNA的結(jié)合呢？ |
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這個不清楚，我們課題組去年也遇到這問題，最后定的做酵母，因為我們的轉(zhuǎn)錄因子還設(shè)計到與其他蛋白形成異二聚體的問題，所以單雜雙雜一起做了，就沒有考慮免疫共沉淀和凝膠阻滯實驗。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
8樓2015-09-19 06:36:19
Neo2000
木蟲 (著名寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
行板如歌: 金幣+5, ★有幫助, 實驗室沒有酵母體系，不知道有公司做這個沒有？ 2015-09-18 19:15:36
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行板如歌: 金幣+5, ★有幫助, 實驗室沒有酵母體系，不知道有公司做這個沒有？ 2015-09-18 19:15:36
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做個酵母單雜就行 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2015-09-18 16:09:05
3樓2015-09-18 16:10:57
【答案】應(yīng)助回帖
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行板如歌: 金幣+5, ★有幫助, 送公司應(yīng)該選什么技術(shù)來測比較準(zhǔn)確呢？ 2015-09-18 19:16:33
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行板如歌: 金幣+5, ★有幫助, 送公司應(yīng)該選什么技術(shù)來測比較準(zhǔn)確呢？ 2015-09-18 19:16:33
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送公司把，估計一兩k就出來了，酵母雜交實驗要建酵母體系，很麻煩，凝膠阻滯實驗要用到放射性同位素。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2015-09-18 16:14:56
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