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一城之主耀

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我提的是微藻的總蛋白，液氮研磨，裂解液溶解。可是每次條帶斗跑不出來(lái)。這次跑出來(lái)的只有很淺的條帶，也挺多的，就是發(fā)現(xiàn)濃度不夠而且出來(lái)拖尾現(xiàn)象。求助各位大神的幫助，一個(gè)月了，苦惱ing！��！

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1樓 2015-09-19 12:49:57

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一城之主耀: 金幣+10, ★有幫助 2015-09-22 09:19:21

可能是你提的蛋白里面雜志太多，可以查查文獻(xiàn)找找蛋白質(zhì)純化的方法

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7樓2015-09-20 14:38:39

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a86052

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【答案】應(yīng)助回帖

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這個(gè)感覺(jué)應(yīng)該是你樣品的問(wèn)題，marker跑的還可以。裂解液里有些什么成分呢？

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2樓2015-09-19 14:14:06

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2樓: Originally posted by a86052 at 2015-09-19 14:14:06
這個(gè)感覺(jué)應(yīng)該是你樣品的問(wèn)題，marker跑的還可以。裂解液里有些什么成分呢？

裂解液：尿素，硫脲，TeitonX-100，蛋白酶抑制劑，CHAPS；還有就是maker也是有一點(diǎn)兒拖尾現(xiàn)象的。

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3樓2015-09-19 14:17:54

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3樓: Originally posted by 一城之主耀 at 2015-09-19 14:17:54
裂解液：尿素，硫脲，TeitonX-100，蛋白酶抑制劑，CHAPS；還有就是maker也是有一點(diǎn)兒拖尾現(xiàn)象的。...

有沒(méi)有試試把裂解液除掉后制樣電泳？左側(cè)的marker雖有一點(diǎn)拖尾，不過(guò)也可以了，膠本身應(yīng)該問(wèn)題不大

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4樓2015-09-19 14:34:58

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引用回帖:

4樓: Originally posted by a86052 at 2015-09-19 14:34:58
有沒(méi)有試試把裂解液除掉后制樣電泳？左側(cè)的marker雖有一點(diǎn)拖尾，不過(guò)也可以了，膠本身應(yīng)該問(wèn)題不大...

直接做過(guò)用硫脲和尿素，超聲破碎去提藻全蛋白，結(jié)果也是這樣。還有就是會(huì)不會(huì)是微藻本身的鹽粒子濃度高或者是藻的色素影響結(jié)果呢？謝謝

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5樓2015-09-19 21:22:04

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自然_法則

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一城之主耀: 金幣+15, ★有幫助 2015-09-22 09:19:35

marker還可以，但也有輕微拖尾現(xiàn)象，制膠沒(méi)問(wèn)題，跑電泳的電壓是多少呢，考慮下是否是電壓過(guò)高

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每一個(gè)結(jié)果都有與之關(guān)聯(lián)的起因我稱之為結(jié)果論

6樓2015-09-20 13:39:14

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lixihailove

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8樓2015-09-20 16:42:59

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jim326

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蛋白樣品質(zhì)量不高。上樣前煮了嗎，煮完之后離心了嗎？

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9樓2015-09-20 17:17:17

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10樓2015-09-20 18:01:49

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